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Preparación de una solución isotónica
¿Qué es una solución isotónica?
Una solución isotónica es una solución que tiene la misma presión osmótica que otra solución (como el plasma sanguíneo o la savia celular). Cuando una célula se sumerge en una solución isotónica, no hay movimiento neto de agua a través de la membrana celular, por lo que la célula mantiene su forma y tamaño normales.
La presión osmótica de una solución depende de la concentración de solutos disueltos, no del tipo de soluto.
Concepto importante: Osmolaridad
La osmolaridad mide la concentración de solutos en una solución, expresada como el número de osmoles de soluto por litro de solución (Osm/L o mOsm/mL).
Para el plasma sanguíneo y la mayoría de sistemas biológicos:
- Osmolaridad normal ≈ 0,3 Osm/L (300 mOsm/L)
Clasificación del material de laboratorio
Por material de fabricación:
Vidrio, plástico, metal, cerámica
Por función:
Medición, calentamiento, separación, contención
Por precisión:
Material volumétrico calibrado, material graduado
Por uso:
Material general, material especializado
Preparación de una solución salina fisiológica (solución isotónica de NaCl)
Una de las soluciones isotónicas más comunes es el suero fisiológico, que contiene un 0,9% de NaCl en masa o aproximadamente 0,154 M NaCl (300 mOsm/L).
Materiales necesarios
- Cloruro de sodio (NaCl) — masa molar: 58,5 g/mol
- Agua destilada
- Balanza analítica (precisión ±0,1 g)
- Matraz aforado (100 mL o 250 mL)
- Vaso de precipitados
- Probeta graduada
- Varilla de vidrio para agitar
- Embudo
- Vidrio de reloj
Procedimiento: Preparación de 100 mL de solución de NaCl al 0,9%
Paso 1: Calcular la masa de NaCl necesaria
Para una solución al 0,9% en 100 mL:
- Masa de NaCl = (0,9 g / 100 mL) × 100 mL = 0,9 g
Paso 2: Pesar el NaCl
- Colocar un vidrio de reloj sobre la balanza analítica
- Tarar (poner a cero) la balanza
- Medir 0,9 g de NaCl en el vidrio de reloj
- Registrar la masa exacta medida
Paso 3: Disolver el NaCl
- Transferir el NaCl a un vaso de precipitados
- Añadir aproximadamente 50 mL de agua destilada
- Agitar con la varilla de vidrio hasta que el NaCl se disuelva completamente
Paso 4: Transferir al matraz aforado
- Usar un embudo para verter la solución en el matraz aforado de 100 mL
- Aclarar el vaso con pequeñas porciones de agua destilada
- Transferir todos los aclarados al matraz aforado
Paso 5: Ajustar al volumen final
- Añadir agua destilada hasta que la solución esté aproximadamente 1 cm por debajo del aforo
- Añadir agua destilada gota a gota hasta que la parte inferior del menisco toque la línea de aforo
- Tapar el matraz e invertirlo 10 veces para mezclar bien
Paso 6: Verificación
¡Tu solución isotónica está lista! Debería:
- Ser incolora y transparente
- No mostrar ningún sedimento
- Tener una osmolaridad ≈ 300 mOsm/L
Conversiones de unidades para la preparación de soluciones
Conversión entre unidades comunes
Molaridad (M) a % m/v:donde i es el factor de van't Hoff (número de partículas que se producen al disolver el soluto):
- NaCl: i = 2 (se disocia en Na⁺ y Cl⁻)
- Glucosa: i = 1 (no se disocia)
- CaCl₂: i = 3 (se disocia en Ca²⁺ y 2Cl⁻)
Conversiones de ejemplo para NaCl
- 0,9% m/v a Molaridad:
- 0,154 M a g/L:
- 0,154 M NaCl a osmolaridad:
Técnicas de medición
Lectura del menisco
- Lectura correcta: Sitúa los ojos a la altura del líquido
- Parte inferior del menisco: En soluciones acuosas, lee en el punto más bajo
- Probetas graduadas: Menos precisas que los matraces aforados
- Matraces aforados: Tienen una sola línea; llenar hasta que la parte inferior del menisco toque el aforo
Uso de la balanza analítica
- Colocar el vidrio de reloj y tarar la balanza
- Añadir NaCl gradualmente hasta alcanzar la masa deseada
- Registrar el valor exacto mostrado
- Retirar el vidrio de reloj con cuidado
Uso del matraz aforado
- Llenar con disolvente hasta aproximadamente 2/3 de la capacidad
- Cambiar a un gotero para los ajustes finales
- Asegurar que la parte inferior del menisco coincide con la marca de aforo
- Mezclar bien tras la preparación
Comprobación de isotonicidad
Para verificar que tu solución es realmente isotónica, puedes realizar una prueba sencilla:
Prueba de hemólisis con células de huevo:- Colocar unas gotas de tu solución en un portaobjetos
- Añadir una gota de suspensión de células de huevo de gallina
- Observar al microscopio:
Errores comunes que hay que evitar
- No alcanzar el equilibrio de temperatura antes del ajuste final de volumen
- Disolución incompleta del soluto antes de la transferencia
- Error de paralaje al leer el menisco
- No aclarar bien el vaso de precipitados y el embudo
- Usar material de vidrio sucio
- No mezclar la solución final con el tapón